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知识分享:教你辨析标记基因和报告基因

发布时间:2020-06-30浏览次数:54返回列表

    一、标记基因和报告基因的概念

    标记基因(marker gene),是一种已知功能或已知序列的基因,能够起着特异性标记的作用。标记基因是选择标记基因的简称,是指其编码产物能够使转化的细胞、组织具有对抗生素等的抗性,或者使转化细胞、组织具有代谢的优越性。在培养基中加入抗生素等选择试剂的条件下,非转化的细胞死亡或生长受到抑制,而转化的细胞能够继续存活,从而将转化的细胞、组织从大量的细胞或组织中筛选出来的一类基因。在基因工程意义上来说,它是重组DNA载体的重要标记,通常用来检验转化成功与否;在基因定位意义上来说,它是对目的基因进行标志的工具,通常用来检测目的基因在细胞中的定位。

    报告基因(reporter gene),是指其编码产物能够被快速地测定,常用来判断外源基因是否已经成功地导入受体细胞、组织或器官,并检测其表达活性的一类特殊用途的基因,主要用于判断目的基因是否成功导入到受体细胞,并在其中表达。故当报告基因被用来区分转化和非转化细胞、组织、器官时,也可将其称为标记基因。报告基因不仅能作为标记基因,此外,报告基因还能用于研究基因的表达调控,检测启动子的活性,发现新的启动子,观察报告基因和目的基因的融合蛋白在细胞内的位置等。



    二、标记基因和报告基因的区别与联-系

    二者的联-系在于:报告基因都可以看做是标记基因。报告基因也有标记的作用,标记目的基因是否成功转化的作用,但是它们又有着各自的特点。

    标记基因通常用来检验重组DNA载体转化成功与否,或者检测目的基因在植物细胞或组织中的定位。常用的标记基因是一些抗生素抗性基因,如卡那霉素抗性基因、潮霉素标记基因等。

    而作为报告基因,在遗传选择和筛选检测方面必须具有以下几个条件:

1)已被克隆和全序列已测定;

2)表达产物在受体细胞中不存在,即无背景,在被转染的细胞中无相似的内源性表达产物;

3)表达产物唯1,对受体细胞无-毒,并且能进行定量测定。目前常用的报告基因有氯霉素乙酰转移酶基因(cat)、荧光素酶基因(luc)、β-葡萄糖苷酸酶基因(gus)、分泌型碱性磷酸酶基因(seap)、绿色荧光蛋白基因(gfp)等。